主要完成人：張建峰、劉誌成、和彥良、馬祥、謝樂新、盧受昇、黃律、黃念、吳瑩瑩、黎少國、孫俊穎、沈海燕、張春紅、王片片、文開順

主要完成單位：必威betways 動物衛生研究所、廣東省動物疫病預防控製中心、華威特（江蘇）生物製藥有限公司、廣東省現代農業裝備研究所、勃林格殷格翰動物保健（上海）有限公司、佛山瑞寶動物保健有限公司、惠州東進農牧股份有限公司、廣東廣寧廣三保畜牧有限公司

獲獎類別：必威betways 科技進步獎一等獎

成果簡介：

本項目聚焦豬藍耳病和豬偽狂犬病（簡稱兩病）精準診斷技術匱乏、疫苗種類繁多且免疫保護力比較研究缺失、淨化體係不完善等疫病淨化核心問題。

1.建立基於HRM和FMCA技術研發針對兩病疫苗株和野毒株的精準分子鑒別技術，形成檢測體係，搭建精準檢測研發平台。 針對豬藍耳病、豬偽狂犬病疫苗毒株多、基因型複雜、精準診斷技術匱乏的現狀，利用HRM和FMCA技術對核酸差異精準可視化的特點，設計了四對引物和四條探針，組合建立了豬藍耳經典毒株、變異毒株、JXA1-R、GDr180、TJM-F92等野毒及疫苗毒株精準檢測體係和豬偽狂犬歐美株、中國株及Bartha-K61疫苗毒株的分子鑒別檢測體係，前者克服了豬藍耳臨床毒株複雜和疫苗毒株多的現實難點，後者攻克了豬偽狂犬GC高、PCR擴增難的技術難點，為排除疫苗株幹擾開展精準臨床診斷提供技術手段，解決了實際生產中臨床精準檢測缺乏、高通量診斷難等問題。

2.研製可實現鑒別檢測的高致病性豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗，構建疫苗免疫防控流行毒株的保護效力比較評測體係。

篩選獲得具有Nsp2基因序列缺失360bp的特色疫苗毒株，以此作為與野毒株鑒別標誌用於臨床分子鑒別檢測和免疫抗體檢測；采用微載體懸浮培養技術對毒株進行細胞培養條件優化，大大提高病毒滴度，減少細胞降解及汙染的風險，該疫苗產品對經典毒株、NADC30-Like毒株均有良好的交叉保護作用，無免疫幹擾、效果良好。基於商品化疫苗種類繁多、疫苗效力比較數據缺乏的現狀，通過開展係統化動物保護評估試驗，構建了疫苗免疫防控流行毒株的保護效力比較評測體係，為優化淨化方案、優選疫苗提供重要參考。

3.製定科學有效的“兩病”淨化控製方案，應用於200多家規模化豬場，效果良好。方案融合了“兩病”精準分子診斷技術、疫苗免疫、抗體評測體係以及生物安全防控技術，通過政府行業部門、研究所及養殖企業的通力合作，“兩病”淨化示範成效顯著。16家規模化養殖企業獲得17個省級偽狂犬淨化場授牌並維持豬偽狂犬淨化狀態，3家獲得國家級豬偽狂犬淨化場授牌，所有34家豬藍耳病均處於控製狀態，淨化控製成效助力9家養殖場通過國家無非洲豬瘟小區驗收。

該項目獲得新獸藥證書1件，生產批文1個，高新技術產品證書1個，授權國家發明專利4件（成功轉化1件），發表文章7篇（SCI 4篇）；累計培訓技術人員11.5萬人次；“兩病”控製淨化效果顯著，推動了全國、華南地區特別廣東省生豬養殖產業高質量發展；2019-2021年底示範推廣企業新增銷售額35.5億元，新增利潤24億元，帶動周邊農民就業率與收入的增長，經濟效益顯著。