近日，動衛所在微生物學期刊Frontiers in Microbiology（二區，IF=5.2）發表了題為“Pseudorabies gD protein protects mice and piglets against lethal doses of pseudorabies virus”的研究性論文。該研究表明哺乳動物細胞（HEK 293T）表達係統產生的gD蛋白具有良好的免疫原性，能刺激小鼠和仔豬體內產生高水平的抗偽狂犬病毒特異性抗體和中和抗體，可以保護其應對致死劑量的偽狂犬病毒攻擊，對新型偽狂犬疫苗的開發具有重要意義。動衛所與華南農業大學聯合培養的博士研究生趙夢坡、動衛所陳晶副研究員、羅勝軍副研究員為論文共同第一作者，華南農業大學袁子國教授和動衛所王曉虎研究員為論文共同通訊作者。

偽狂犬病毒株係的不斷進化，使得研究人員不斷在探索新型疫苗的研發。與原核表達相比，哺乳動物細胞能正確處理自身表達的蛋白質和外源蛋白質，是體外獲得高活性蛋白質的首選表達係統。研究小組與南方醫科大學李紅衛教授團隊合作，利用HEK 293T表達係統，對分泌表達在HEK 293T細胞上清中的gD蛋白進行純化及鑒定。實驗結果表明，gD蛋白可以刺激小鼠和仔豬產生高水平PRV-HY特異性抗體和中和抗體。用10³TCID₅₀劑量的PRV-HY對小鼠進行攻毒，gD蛋白免疫組的所有小鼠均存活；用10⁷TCID₅₀劑量的PRV-HY對仔豬進行攻毒，gD蛋白免疫組的所有仔豬均存活，且無典型的臨床症狀。這表明該gD蛋白可誘導小鼠和仔豬機體產生的堅強的免疫。此外，gD組仔豬鼻拭子和肛拭子中的病毒基因拷貝數明顯低於商品化疫苗組，且對環境的排毒周期更短（圖1）。

圖1攻毒後仔豬排毒量、組織病毒含量和存活率

與商品化疫苗組相比，gD免疫組仔豬淋巴結、肺、脾、肝、腎的病理變化較少，組織中感染PRV-HY的陽性細胞較少（圖2）。主要原因在於gD蛋白能迅速誘導宿主機體產生較高水平的中和抗體。另一方麵，ISA 201佐劑能有效刺激宿主產生強大的粘膜免疫，與gD蛋白具有一定的協同作用。該研究結果為開發一種新型豬偽狂犬基因工程亞單位候選疫苗奠定了基礎。

圖2 攻毒後仔豬組織病理變化和HE染色

本研究得到了廣東省科技計劃項目（2021B1212050021）、“十四五”國家重點研發計劃（2021YFD1801400）以及廣東省農業科學研究院協同創新中心項目（XTXM202202）等支持。

原文鏈接：https://doi.org/10.3389/fmicb.2023.1288458