禽病/生物技術研究室
依托農業農村部禽流感等家禽重大疾病防控重點實驗室,廣東省畜禽疫病防治研究重點實驗室開展科研工作,由廖明教授領銜,圍繞畜禽疫病開展診斷試劑和疫苗研製。團隊現有固定工作人員23人,其中高級職稱10人,博士13人。
主要從事重要動物疫病新型分子診斷試劑和生物製品研發,涵蓋禽坦布蘇病毒、鵝星狀病毒及豬病毒性腹瀉相關病原的致病機製研究。搭建HRM分型檢測技術和POCT快速檢測技術平台,開發適合於臨床實時檢測病原的方法及精準分型檢測方法;搭建細胞懸浮培養工藝技術平台,研發防控豬病毒性腹瀉、禽腺病毒等重要動物疫病疫苗產品;聚焦影響家禽產業的鵝星狀病毒、坦布蘇病毒和生豬產業的豬病毒性腹瀉疾病,探究致病原與宿主互作機製。
先後承擔國家重點研發計劃、國家自然科學基金、國際betway亞洲官方 專項、農業公益性行業專項,以及省科技廳、省農業農村廳、市科技局等的各類科研項目100餘項,獲省科技進步獎、省農業技術推廣獎等8項,授權國家發明專利36件,獲農業農村部新獸藥臨床試驗批件6個。
新型診斷檢測技術研發平台
圍繞動物疫病鑒別診斷和現場檢測兩大技術難點,搭建了重要動物病原檢測平台,先後建立了鴨鵝細小病毒、坦布蘇病毒、鵝星狀病毒、鴨鵝呼腸孤病毒、禽腺病毒、豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒、豬流行性腹瀉病毒、豬瘟病毒、豬偽狂犬病毒、豬乙型腦炎病毒、布魯氏杆菌病等多種重要動物疫病基因分型及POCT檢測方法,以及動物常見病原快速檢測體係。先後發現鵝新型呼腸孤病毒、禽腺病毒2型、鴨腺病毒4型、鴨星狀病毒5型、豬新型輪狀病毒等多種新發疫病。
瞄準國家動物疫病防控和淨化技術需求,凝練了“鴨坦布蘇病毒病綜合防控技術”、“禽支原體病綠色防控技術”、“豬重要疫病淨化控製新技術”和“豬流行性腹瀉綜合防控關鍵技術”,並且連續多年入選廣東省農業主推技術,以廣東省家禽產業園和生豬產業園建設為紐帶,深入參與省級動物疫病淨化及無疫小區建設,推動廣東省畜禽養殖業高質量發展。
獸用生物製品研發應用平台
聚焦畜禽養殖業發展技術需求,與國內外疫苗研發企業合作,開展細胞懸浮培養技術工藝、CHO細胞真核表達體係、免疫增強劑組合、致弱重組病毒及活 載體疫苗表達體係等新型疫苗研發技術攻關,研製“鴨坦布蘇病毒病滅活疫苗(JM株)”、“鴨傳染性漿膜炎活疫苗(1型GD12株)”、“雞新城疫、禽流感(H9亞型)、禽腺病毒病(I群4型)、雞滑液支原體四聯滅活疫苗(D-VII株+HuN20株+SD15株+HLJ株)”、“禽腺病毒(I群4型)卵黃抗體”、“豬傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉、豬δ冠狀病毒病三聯滅活疫苗(SD14株+HuN16株+HeN17株)”、“豬偽狂犬病滅活疫苗(WuC-∆gE/gI株)”獲得農業農村部臨床試驗批件,其中“鴨坦布蘇病毒病滅活疫苗(JM株)”和“豬傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉、豬δ冠狀病毒病三聯滅活疫苗(SD14株+HuN16株+HeN17株)”正在注冊,“雞新城疫、禽流感(H9)、禽腺病毒(I群,4型)三聯滅活疫苗(LaSota株+HS株+DN株)”正在複核。
長期與勃林格殷格翰動物保健(中國)有限公司開展豬繁殖與呼吸綜合征疫苗的異源毒株攻毒保護效果評價工作,為生豬養殖業臨床疫苗選擇提供參考;與天津瑞普生物技術股份有限公司、齊魯動物保健品股份有限公司、哈藥集團生物疫苗有限公司、乾元浩生物股份有限公司等國內知名生物技術企業聯合開展家禽技術服務,為家禽養殖業提供生物製品臨床效果評估、疫病精準診斷和防控方案製定。
病原與宿主互作機製研究平台
(一)闡明PEDV與宿主細胞相互作用的機製
1.運用比較蛋白質組學鑒定了PEDV增殖中發揮關鍵作用的宿主因子,分析了PEDV感染的差異蛋白,篩選了PEDV感染所需的關鍵受體,獲得了PEDV感染中發揮重要作用的宿主蛋白。
2.基於非靶向代謝組學分析PEDV對宿主細胞的代謝調控機製,解析了PEDV感染細胞的差異代謝成分和代謝網絡,找到了在PEDV天然免疫中發揮作用的代謝通路,篩選到了一種促進PEDV增殖的代謝產物。
3.建立了豬全基因組GeCKO文庫,篩選了PEDV感染中關鍵的宿主因子,獲得了穩定表達Cas9的IPEDC-J2細胞係,篩選了促進/抑製PEDV增殖的宿主因子。
4.闡明了IFN-λ3通過TLR7/9和MyD88激活JAK-STAT通路,活化幹擾素刺激反應元件,促進PKR、OAS1和ISG15等表達發揮抗PEDV的作用機製。
5.創建了豬的細胞係改造平台,通過RNA幹擾技術、CRISPR基因敲除技術和受體表達技術,培育3株有效增殖PEDV的細胞株,為研發新型疫苗提供了支撐。
6.開發具有抗PEDV活性的中藥提取物或化合物,篩選PEDV增殖賴以生存的信號通路的抑製劑(中藥提取物),負向調控PEDV感染所需代謝通路的代謝產物(化合物),發現了抗PEDV的代謝衍生物和中藥提取物,作為疫苗防控PED的有效輔助手段。
(二)闡明坦布蘇病毒、鵝星狀病毒與宿主細胞相互作用的機製
1.建立坦布蘇病毒反向遺傳操作平台和疫苗研製平台,證實E和NS蛋白與宿主因子TBK1互作從而影響病毒複製,明確E蛋白是影響TMUV在雞體內複製能力的關鍵病毒蛋白。證實鴨驅動蛋白KIF2A能夠促進病毒複製,而Viperin蛋白抑製病毒複製。
2.建立雛鵝“痛風”發病模型,闡明波形蛋白與鵝星狀病毒VP70蛋白及其RNA相互作用促進病毒複製,證實鵝星狀病毒通過抑製過氧化氫酶基因的表達來抑製宿主的氧化還原反應;激活Toll樣受體2途徑以增強免疫炎症反應;激活乳酸合成中的關鍵酶以產生抑製宿主抗病毒反應的乳酸積累,從而促進病毒自身的複製。